Saturday, May 14, 2016

 

大腦與行為的對話:『分子行為神經科學』實驗手札....

你知道你的大腦如何運作嗎?科學家如何探究基因與行為的關係?

      神經科學是二十一世紀的顯學,我們的大腦如何運作?進而產生我們的感官知覺、記憶思考、甚至是人格特質?寫這些網誌的初衷,一方面是希望提供一個平台,一個交流神經科學技術的中文討論區;另一方面,我希望替自己多年來在實驗室的實戰經驗寫日記,以後我的學生或有興趣的後進可以參考。網站內容主要分為五個部份,從最基本的DNA、RNA抽取、基因工程、PCR技術、Cell culture、Southern/Northern/Western blotting到基因轉植鼠的製作與基因轉植小鼠可能phenotype的分析,希望這些資訊對讀者在實驗室的實戰工作上有所幫助;最後!我著重在科學新知的分享上,我希望可以透過翻譯最新,最有趣的科學期刊來引起普羅大眾對神經科學的興趣!
      我堅信健全的科學文化建立在精彩的科普作品,接觸神經科學,讓這文化深植在大家的心中!

神經科學技術分享

cloning(中國大陸翻譯成客隆),是一切分生實驗的基礎,這網頁的資訊教你如何用最少的經費,完成一流得客隆實驗。 


基本功(ㄧ)不用KIT抽取質體DNA
 
基本功(二)大量製備高純度的質體DNA 
基本功(三)如何製作勝任細胞
實戰範例(ㄧ)
基本功(四)T/A cloning & 藍白挑 
高級班(一)找不到可用的切點怎麼辦
高級班(二)如何screen大量的clones?  PCR v.s  Colony hybridization
高級班(三)substraction cloning 

想要養細胞嘛?細胞culture實驗雖然有很多的詬病,但它確實提供一個快速而簡單實驗模式!想作好 Neuroscience,一定要先學會怎麼養細胞!


基本功(ㄧ)配置無菌的medium,如何解凍、subculture細胞
基本功(二)如何進行細胞的transfection
實戰範例(ㄧ)Tet-on construct testing in hNT-2 cell
基本功(三)免疫螢光染色
基本功(四)primary culture of mouse DRG neuron
高級班(一)螢光蛋白GFP的妙用與迷思
高級班(二)免疫沈澱的原理與實作 

Blotting 是一門很重要的學問,不管你是核醣核酸(去氧不去氧)還是蛋白質,你都會需要這方面的基本訓練!


基本功(一)小鼠genomic DNA的抽取
基本功(二)Southern blotting & trouble shooting
基本功(三)鼠腦分區、pouch你有興趣的神經核
基本功(四)Western blotting & trouble shooting
實戰範例(ㄧ)基因鼠的genotyping:PCR v.s Southern blotting
高級班(一)用超高速離心分離細胞膜的蛋白質

Mouse genetics是現在很紅的一門顯學,你知道怎麼把一個基因放進一隻活生生的老鼠身上?怎麼把你有興趣的基因從老鼠身上剃除掉 ?


基本功(一)DNA preparation
基本功(二)Super ovulation &  eggs handling
基本功(三)Pronuclei microinjection
實戰範例(ㄧ)我的第一隻transgenic mice 
基本功(四)如何設計與製作knockout construct
基本功(五)Culture of ES cell 
基本功(六)基因標地 gene targeting 
基本功(七)Electroporation and pick up ES clone 
高級班(ㄧ)cloning的未來趨勢:BAC to the future 
高級班(二)In vitro fertilization &冷凍精子減少開支
高級班(三)Cre/loxp:tool for conditional knockout 

What's wrong with my mouse? 基因鼠的行為與生理研究! 美國科學研究計劃從1990至2000年是大腦科學的十年(decade of Brain)而2000至2010年確定為行為科學的十年(decade of Behavior)。


基本功(ㄧ)實驗設計與統計概說
基本功(二)小鼠的行為測試-初級
基本功(三)小鼠的行為測試-高級
補充篇(一)如何照顧,培育與handle小鼠
補充篇(二)手術小百科 
高級班(一)Immunohistochemical staining using mouse brain
高級班(二)in situ hybridization using mouse brain
高級班(三)RT-PCR & real-time PCR
高級班(三)ChIP assay 
高級班(三)HPLC & Microdialysis
高級班(四)Brain surgery & in vivo gene deliver

科學論壇

      以下是我個人再念paper後的心得分享區,我喜歡在看完一篇好文章之後把自己的心得寫下來。再這裡和大家分享,這些文章大多發表在我個人的Blog上,在這裡作一個連結!歡迎志同道合的夥伴們不吝給予批評和指教! 

複製人可行嗎?
意外的干擾,2006諾貝耳獎得主簡介。
哈哈!老鼠有同情心嗎?
 「癢」的神經生物學機制!
批腿基因? 崛起中的神經內分泌學...
現在幾點鐘...有趣的生物時鐘!
你有肥胖的問題嗎?leptin 的發現與應用

你吃飽了嗎?....問問你的下視丘
用音樂加速你的腦力:介紹官方網站 imusic
人類記憶好壞,KIBRA最知道! 
阿茲罕默症100年回顧。
焦慮的老鼠:5-HT1A & SERT knockout
神經膠細胞調節記憶好壞
阿茲罕默症-都是鈣離子惹的禍



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